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TSK凝膠色譜柱的主要參數和凝膠種類

發布時間:2017-06-23瀏覽:2109次
TSK凝膠色譜柱的主要參數:
⑴柱體積:柱體積是指凝膠裝柱后,從柱的底板到凝膠沉積表面的體積。在色譜柱中充滿凝膠的部分稱為凝膠床,因引柱體積又稱“床”體積,常用Vt 表示。
⑵外水體積:色譜柱內凝膠顆粒間隙,這部分體積稱外水體積,亦稱間隙體積,常用Vo表示。
⑶內水體積:因為凝膠為三維網狀結構,顆粒內部仍有空間,液體可進入顆粒內部,這就分間隙的總和為內水體積,又稱定相體積,常用Vi表示。 不包括固體支持物的體積(Vg)。
⑷峰洗脫體積:是指被分離物質通過凝膠柱所需洗脫液有體積,常用Ve 表示。當使用樣品的體積很少時,(與洗脫體積比較可以忽略不計),在洗脫圖中,從加樣到峰頂位置所用洗脫液體積為Ve。 當樣品體積與洗脫體積比較不能忽略時,洗脫體積計算可以從樣品體積的一半到峰頂位置。當樣品很大時,洗脫體積計算可以從應用樣品開始到洗脫峰升高的彎曲點(或半高處)。
02
TSK凝膠色譜柱凝膠的種類:
(一)交聯葡聚糖凝膠(Sephadex)
⑴ Sephadex G交聯葡聚糖的商品名為Sephndex,不同規格型號的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯數為凝膠得水值的10倍。例如,G-25為每克凝膠膨脹時吸水2.5克,同樣G-200克每克千膠吸水20克。交聯葡聚糖凝膠的種類有G-10,G-15,G-25,G-50,G-75,G-100,G-150,和G-200。因此,“G”反映,凝膠的交聯程度,膨脹程度及分部范圍。
⑵ Sephadex LH-20,是─Sephadex G-25的羧丙基衍生物, 能溶于水及親脂溶劑,用于分離不溶于水的物質。
(二)瓊脂糖凝膠:
商品名很多,常見的有,Sepharose(瑞典,pharmacia ),Bio-Gel-A(美國Bio-Rad)等。瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級鏈如氫鍵來維持網狀結構,網狀結構的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下,它的結構是穩定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9范圍內的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化,也不能高壓消毒,可用化學滅菌活處理。
(三)聚丙烯酰胺凝膠:
是一種人工合成凝膠,是以丙烯酰胺為單位, 由甲叉雙丙烯酰胺交聯成的,經干燥粉碎或加工成形制成粒狀,控制交聯劑的用量可制成各種型號的凝膠。交聯劑越多,孔隙越小。聚丙烯酰胺凝膠的商品為生物膠——P (Bio-Gel P),由美國Bio-Rod廠生產,型號很多,從P-2至P-300共10種,P 后面的數字再乘1000就相當于該凝膠的排阻限度。
(四)聚苯乙烯凝膠
商品為Styrogel , 具有大網孔結構, 可用于分離分子量1600到40,000,000的生物大分子,適用于有機多聚物,分子量測定和脂溶性天然物的分級,凝膠機械強度好,洗脫劑可用甲基亞砜。
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