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正相色譜與反相色譜的區別

發布時間:2017-08-03瀏覽:5020次
正相色譜用的固定相通常為硅膠,以及其他具有極性官能團,如胺基團和氰基團的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基或其他團的極性較強,因此,分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小,即極性強弱的組份zui先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,如:正乙烷、氯仿、二氯甲烷等,以調節流動相的洗脫強度。通常用于分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬于分配色譜。組分的分配比K值,隨其極性的增加而增大,但隨流動相中極性調節劑的極性增大(或濃度增大)而降低。同時,極性鍵合相的極性越大,組分的保留值越大。

反相色譜填料常是以硅膠為基礎,表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色色譜所使用的流動相極性較強,通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強組合zui先被沖出,而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。常用的反相填料有C18、C8、C4、C6H5等。


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