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反相色譜柱應該如何選擇?

發布時間:2023-04-24瀏覽:431次
液相色譜的柱子通常分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合CN, -NH3 等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質,在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(ODS) 稱為C18柱,其它常用的反相柱還有C8, C4, C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱,GPC柱,聚合物填料柱等。
 
反相色譜柱的選擇:
 
1.柱子的PH值使用范圍
 
反相柱優點是固定相穩定,應用廣泛,可使用多種溶劑。但硅膠為基質的填料,使用時一定要注意流動相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8,流動相的PH值小于2時,會導致鍵合相的水解;當PH值大于7時硅膠易溶解;經常使用緩沖液固定相要降解。一旦發生上述情況,色譜柱人口處會塌陷。同樣填料各種不同牌號的色譜柱不盡相同。如果流動相PH較高或經常使用緩沖液時,建議選擇PH范圍大的柱子,例如戴安公司的Acclaim柱PH 2-9或Zorbax的PH 2-11. 5的柱子。
 
2.填料的端基封尾(或稱封口)
 
把填料的殘余硅羥基采用封口技術進行端基封尾,可改善對極性化合物的吸附或拖尾;含碳量增高了,有利于不易保留化合物的分離;填料穩定性好了,組分的保留時間重現性就好。如果待分析的樣品屬酸性或堿性的化合物,最好選用填料經端基封尾的色譜柱。
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